VIASURE SARS-CoV-2 Real Time PCR Detection Kit

Zweck: VIASURE SARS-CoV-2 Real Time PCR Detection Kit dient der spezifischen Identifizierung des neuartigen Coronavirus 2019 (SARS-CoV-2) in Atemwegsproben von Patienten mit Anzeichen und Symptomen einer COVID-19-Infektion Zertifizierung: Validiert nach ISO 13485 und CE –IVD gekennzeichnet Probentyp: Bronchoalveoläre Lavage, Nasensekrete, orale Probe, Speichel, Trachealaspirate, Sputum Target: VIASURE SARS-CoV-2 Real-Time PCR Kit erkennt das Vorhandensein von zwei verschiedenen und hochspezifischen Gensequenzen des SARS-CoV-2: ORF1ab Gene und N-Gene Testzeit : 1,5 h Handhabung: Transport und Lagerung bei Raumtemperatur (2°C-40°C). Nur die gelöste Positivkontrolle wird auf -20°C aufbewahrt Haltbarkeit: min.12-max.24 Monate Komponenten: lyophilisiert und „all-inclusive“ – alle benötigten Komponenten sind gebrauchsfertig inklusive interner Kontrolle in jedem Pellet Reagenz/Material Beschreibung Farbe Menge SARS-CoV-2 8-Well-Streifen (teilbar)* Eine Mischung aus Enzymen, Primer, Sonden, Puffer, dNTPs, Stabilisatoren und interner Kontrolle in stabilisiertem/lyophilisiertem Format Weiß 6/12 x 8-Well-Streifen Rehydrationspuffer Lösung zur Rekonstitution des lyophilisierten Produkts Blau 1 Fläschchen x 1,8 ml SARS-CoV-2-Positivkontrolle Nicht infektiöse synthetische lyophilisierte cDNA Rot 1 Fläschchen Negative Kontrolle Non-template Kontrolle Violett 1 Fläschchen x 1 ml Wasser RNAse / DNAse frei RNAse / DNAse freies Wasser Weiß 1 Fläschchen x 1 ml 8-Kappen-Streifen –(teilbar) Optische Kappen zum Verschließen von Vertiefungen während des Real Time PCRs Transparent 6/12 x 8-Kappenstreifen *Oder 96-well Platte oder 4-Well-Streifen (für Qiagen/Corbett Rotor-Gene®-Instrument) Zusätzliche notwendige Ausrüstung/Materialien:

Real-Time PCR Instrument (Thermocycler).

RNA-Extraktionskit /Automat

Zentrifuge für 1,5-ml-Röhrchen und PCR-Well-Streifen oder 96-Well-Platten (falls verfügbar)

Vortex

Mikropipetten (0,5-20 μl, 20-200 μl).

Gefilterte Pipettenspitzen

Puderfreie Einweghandschuhe

Ladeblock (nur bei Verwendung mit Qiagen / Corbett Rotor-Gene®-Instrumenten). APPLIKATION – FAQ F: Ist das Kit schon routinemäßig in Verwendung? Ja. Weltweit. Auch in Österreich, als auch in anderen EU-Länder: UK, Deutschland, Norwegen, Irland, Spanien, Griechenland, Portugal, Frankreich, Polen..etc. F: Kann dieses Kit als Schnelltest verwendet werden? Nein. Dieses Kit kann nur in voll ausgestatteten Labors mit einem Real-Time PCR Instrument verwendet werden. F: Ist das Kit mit jedem Real-Time PCR Instrument kompatibel? Das Kit ist mit jedem Real-Time PCR Instrument kompatibel, das FAM (ORF1ab Gen), ROX (N Gen) und und HEX /JOE/VIC (Interne Kontrolle) Signal messen kann. F: Für welche Real-Time PCR Geräte wurde das Kit validiert? Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System, Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System, Bio-Rad CFX96™ Real-Time PCR Detection System, Agilent Technologies AriaMx Real-Time PCR System, DNA-Technology DTprime Real-time Detection Thermal Cycler, DNA-Technology DTlite Real-Time PCR System, Rotor-Gene® Q (Qiagen), SmartCycler® (Cepheid), Roche Molecular Diagnostics Cobas z480 Analyzer, VIASURE 48 Real Time PCR System und VIASURE 96 Real Time PCR System. Bei Verwendung des Applied Biosystems 7500 Fast mit Streifen wird empfohlen, einen Plattenhalter anzubringen, um das Risiko eines Quetschens des Röhrchens zu verringern (Ref. PN 4388506). Bei Verwendung des Roche Molecular Diagnostics Cobas z480 Analyzer benötigt man zusätzlich einen Color Compensation Kit und einen Plattenhalter, um das Risiko eines Quetschens des Röhrchens zu verringern (beides über uns zu beziehen). F: Welche Proben können untersucht werden? Atemwegsproben, einschließlich nasopharyngealer / oropharyngealer Aspirate oder Waschungen, nasopharyngealer oropharyngealer Abstriche, broncheoalveolärer Lavage, trachealer Aspirate und Sputum. Tupferproben sollten nur auf Tupfern mit einer synthetischen Spitze (wie Polyester oder Dacron®) mit Aluminium- oder Kunststoffschäften gesammelt werden. Tupfer mit Kalziumalginat oder Baumwollspitzen mit Holzschäften sind nicht zulässig. F: Wie viele Proben kann ich testen? Sie haben die Wahl: Analysieren Sie 1 bis 94 Proben pro Lauf, bei Bedarf auch einzelne Proben. F: Mit welchen Extraktionskits/ -automaten wurde das Kit validiert?

Viasure RNA-DNA Extraction kit (VIASURE)

Maxwell® 16 Viral Total Nucleic Acid Purification Kit / Maxwell® 16 Instrument (Promega)

Total Nucleic Acid Isolation (TNAI) Kit / COBAS® AmpliPrep (ROCHE)

MagDEA Dx SV kit / magLEAD® 12gC Instrument (Precision System Science Co.)

MagCore® Viral Nucleic Acid Extraction Kit / MagCore® HF16 Automated Nucleic Acid Extractor System F: Wie lange ist die “hands on time”? Je nach Anzahl der Proben. Es sind 4 einfache Schritte der Probenvorbereitung: 1. 15 µl Rehydrationspuffer zu jedem Röhrchen zugeben 2. 5µl von Probe / Positivkontrolle / Negativkontrolle zugeben 3. Vortexen + Zentrifugieren 4. Ins Real-Time PCR geben F: Wann ist eine Probe für SARS-CoV-2 als positiv anzusehen? Eine Probe wird als positiv angesehen, wenn der erhaltene Ct-Wert weniger als 38 beträgt und die interne Kontrolle ein Signal zeigt oder nicht. Manchmal ist der Nachweis der internen Kontrolle nicht erforderlich, da eine hohe Kopienzahl des Ziels eine bevorzugte Amplifikation der zielspezifischen Nukleinsäuren verursachen kann. F: Wann ist eine Probe für SARS-CoV-2 als negativ anzusehen? Eine Probe gilt als negativ, wenn die Probe im Detektionssystem kein Signal zeigt, die interne Kontrolle jedoch positiv ist. Eine Hemmung der PCR-Reaktion kann durch die Amplifikation der internen Kontrolle ausgeschlossen werden. F: Was ist, wenn negative Kontrolle für einen Assay einen positiven Ct ergeben? Wenn dies der Fall ist, wurde die Reaktion mit Proben-RNA kontaminiert. Dekontaminieren Sie Geräte und Arbeitsbereiche und wiederholen Sie die Reaktionen.